立式高压蒸汽灭菌器是实验室和医疗场所常用的灭菌设备,其通过高温高压蒸汽杀灭微生物(包括细菌芽孢)。测定的核心目的是验证灭菌效果是否符合要求,主要包括物理参数监测、化学指示物监测和生物指示物监测三类方法,需结合使用以确保灭菌质量。
1.使用前检查与准备
-外观与密封性检查:确认灭菌器外壳、门封条无破损,门锁装置灵活有效;检查压力表、安全阀、排气阀等部件是否正常。
-水位与水质确认:向灭菌器内胆加水至规定水位(通常为“高水位”标记),建议使用去离子水或蒸馏水,避免水垢堵塞管道。
-物品装载准备:待灭菌物品需分类包装(如使用耐温高压蒸汽灭菌袋、棉布包或金属盒),包装外标注物品名称、日期;器械类需松散放置,避免堆叠过密;液体类(如培养基)需用透气瓶塞密封,防止沸腾溢出。
2.启动与运行参数设置
-装锅与关门:将包装好的物品均匀放入内胆,注意不要遮挡温度传感器;关闭灭菌器门,旋紧门锁至密封。
-选择灭菌程序:根据物品类型设置参数(常规参考值):
-压力:103.4 kPa(约15 psi);
-温度:121℃;
-时间:15-30分钟(普通器械15分钟,液体或大体积物品延长至20-30分钟)。
-启动运行:按下电源开关,设备自动加热。当压力升至50 kPa左右时,打开排气阀排除冷空气(关键步骤!未排尽冷气会导致局部温度不足);待压力回降至0后关闭排气阀,继续升温至目标参数。
3.灭菌过程监控
-物理参数记录:通过设备自带压力表和温度记录仪,实时观察压力(稳定在103.4 kPa)、温度(稳定在121℃)及时间是否达标,确保整个灭菌周期符合设定要求。
-化学指示物验证:
-包内指示卡:每个待灭菌包裹内放置化学指示卡(如爬行式或变色型),若指示卡颜色/图案达到标准(如变为黑色或有“合格”字样),表明该包裹经历了足够的蒸汽和温度。
-包外指示胶带:粘贴于包裹表面,灭菌后观察是否变色(如由浅黄变深棕),用于区分已灭菌与未灭菌物品。
4.冷却与干燥
-灭菌完成后,不可立即强行降压或开门!需等待压力自然降至0(约10-20分钟),否则可能因突然减压导致液体暴沸或玻璃器皿破裂。
-对于干燥要求高的物品(如手术衣、敷料),可开启设备的“干燥”功能(部分型号支持),通过抽气或持续通入无菌空气加速水分蒸发。
5.取出与效果评价
-取出物品:确认压力归零后,缓慢开启锅门,佩戴隔热手套取出物品,检查包装完整性(无潮湿、破损)。
-生物指示剂检测(金标准):定期(每月至少1次)进行生物监测,使用嗜热脂肪芽孢杆菌孢子条(ATCC 7953)作为指示菌。将孢子条置于灭菌的位置(如底层中央),灭菌后送检培养(56℃孵育48小时)。若培养基不变浑浊(阴性),说明灭菌成功;若浑浊(阳性),需排查原因并重新灭菌。
立式高压蒸汽灭菌器的使用注意事项:
-严禁超压超温:不得超过设备标定的工作压力(通常≤137.9 kPa)和温度(≤135℃),否则可能导致爆炸风险。
-禁止密闭容器灭菌:试剂瓶、离心管等需松开盖子或使用透气封口膜,避免内部压力过高引发爆裂。
-特殊物品谨慎处理:塑料、橡胶制品(如硅胶管)需确认耐温性(部分材质不耐受121℃长时间加热);锐利器械(如注射器针头)应固定方向,防止刺破包装。
-防烫伤:灭菌器外壁高温,取放物品时必须使用隔热手套;刚灭菌完毕的物品仍需冷却后再接触。
-防蒸汽灼伤:排气时蒸汽温度高,避免面部靠近排气口;若发生蒸汽泄漏,立即断电并撤离现场。
-定期清洁:每次使用后清理内胆残渣,擦拭外壳;每月拆卸喷汽滤网清洗,防止堵塞影响蒸汽循环。
-性能校验:每年由专业机构对压力表、安全阀、温度传感器进行校准,确保计量准确。
-停用管理:长期不用时应排空内胆存水,保持门微开通风,避免霉菌滋生。
-若运行中出现异常报警(如超压、缺水),立即切断电源,待压力降至常压后排查故障(联系厂家维修)。
-发现生物指示剂阳性结果时,立即召回该批次所有灭菌物品,重新处理并分析原因(如排气不、装载过量等)。